母种培育基的制造

1.　母种培育基的种类

母种是菌种出产的要害，要求纯度高，不能混生杂菌，一起母种的菌丝体较为纤细，分化培育料的才干较弱。因而，母种菌丝体需求培育在营养丰厚，易被吸收，外表润滑易于辨别有无杂菌感染的琼脂培育基上。合适母种菌丝成长的琼脂培育基种类许多，常用的有下列几种：

① 马铃薯—葡萄糖—琼脂培育基：　马铃薯（去皮） 200克 琼脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升 

② 麦芽汁—葡萄糖—琼脂培育基：　干麦芽 250克 琼脂 15～20克 葡萄糖（或蔗糖） 10克 水 1000毫升 

③ 胡萝卜—葡萄糖—琼脂培育基：　胡萝卜 100克 琼脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升 

④ 蘑菇汁—葡萄糖一琼脂培育基（适用于蘑菇）：　鲜蘑菇 250克 琼脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升

⑤ 蛋白胨—葡萄糖—琼脂培育基：　蛋白胨 2克 葡萄糖 20克 磷酸氢二钾 2克 维生素B1（硫胺素） 0.5毫克 磷酸二氢钾 0.5克 琼脂 18克 硫酸镁 0.5克 水 l000毫升

2.母种培育基的制法

以最常用的马铃薯—葡萄糖—琼脂培育基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗刷，切成小块加水1000毫升，煮沸15～20分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，参加琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最终补足水分，使其容量仍为1000毫升。趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要留意不使培育基沾污试管壁和试管口。试管口塞上大小适合的棉花塞，塞入试管口内的长度为棉塞总长的3/5。塞好棉塞后，每10支作一捆，用牛皮纸包扎好后，置铁丝网笼中，然后进行高压灭菌。如作为孢子别离用，则将培育基分装于三角瓶或培育皿中，然后高压灭菌。

3.母种培育基的消毒灭菌

母种培育基通常用高压蒸汽灭菌锅来消毒灭菌，常用的高压蒸汽灭菌锅有直式、卧式和手提式三种。将制造好后的母种培育基移入上述任何一种高压蒸汽灭菌锅中，在15公斤/平方厘米 压力下，消毒灭菌30分钟。

高压蒸汽灭菌首要是依托进步蒸汽的温度来灭菌的，因而灭菌时，应将锅内的冷空气悉数扫除。不然，虽然压力表上的压力已到达要求，可是，灭菌锅内的温度却未到达所需的温度（表11）。扫除冷空气的办法是加热后当压力表上指针上升到0.5公斤/平方厘米时，翻开排气阀，放气至指针仍回到“零”的方位。灭菌的时刻是以扫除冷空气后，压力回升到1.5公斤/平方厘米 时才开端核算。每次灭菌之后，要等压力降到“零”时，才翻开锅盖，不然，灭菌的液领会因俄然减压而外溢，玻璃器皿也会因俄然降温而决裂。 

在没有高压蒸汽灭菌锅设备的情况下，可用蒸锅、蒸笼等进行常压灭菌。因为密封性差，压力升不高，温度只能升至102℃左右因而要接连蒸4～6小时才干到达灭菌的意图。